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摘要:Funakoshi推出的LipiDye Ⅱ脂滴活细胞成像试剂是一种用于活细胞成像的试剂,能够特异性地标记细胞内的脂滴结构,并在显微镜下实现实时观察。该试剂具有高度的灵敏度和准确性,能够清晰地显示出脂滴的形态和动态变化,对于细胞生物学、医学研究以及药物研发等领域具有重要的应用价值。
Funakoshi LipiDye II是一款专为长时间活细胞成像设计的绿色荧光染料,能够观察动态脂滴(LDS)的合成、移动或降解,作为LipiDye(货号:FDV-0010)的升级版,LipiDye II具备超强的光稳定性和高灵敏度等特点。
➧ 产品信息
货号:FVD-0027
规格:0.1mg
化学式:C26H17NO2S2
分子大小:439.5 g/mol
溶解性:溶于DMSO
荧光特性:激发波长Ex. 400-500 nm(峰值~420 nm),与蓝色激发激光器(如405、445、458、473和488 nm激光器)、氙灯或带有商用FITC或GFP滤光片的LED兼容,注:488 nm可激发LipiDye II,但与473 nm激发相比荧光较弱,如果使用488 nm激光,请根据实验经验优化成像条件,如染料浓度等,发射波长Em. 450-650 nm(取决于溶剂),如在豆油中的最大值~510nm,与LD相似,建议在490-550 nm范围内使用。
➧ 产品特点
LipiDye II能够检测非脂肪细胞中直径仅10μm的动态脂滴,这一功能在光学显微镜下即可实现,传统的LDs荧光染料(如尼罗河红)主要限于检测脂肪细胞或经过量脂质处理的细胞中相对较大的LDs,无法实现检测非脂肪细胞的微小LDs,Funakoshi的LipiDye II升级版可检测直径仅1μm的LDs,并适用于长时间活细胞成像,包括短期多时间激发的Z-stack延时成像,LipiDye II具备超高的灵敏度,能够检测到活细胞中的微小变化,相较于旧版LipiDye和传统LD染料,LipiDye II的光稳定性更强,即使在长时间的延时成像下也能保持稳定的荧光强度,其毒性较低,对细胞活力影响较小,它是一款重要的工具,有助于研究脂滴在活细胞中的动态行为及其功能,如需购买Funakoshi公司产品或咨询产品技术问题,请联系Funakoshi授权代理欣博盛生物。
➧ 活细胞成像的一般步骤
在无血清、无酚红的培养基中配制适当浓度的LipiDye II(推荐浓度范围为0.1μM至1μM),去除培养基并用PBS冲洗细胞数次后,将含有LipiDye II的培养基加入细胞中并在37℃下孵育至少30分钟(根据实验经验优化孵育时间),使用PBS或培养基清洗细胞并加入新鲜培养基后观察细胞。
➧ 参考数据
LipiDye II的光谱显示其吸收光谱几乎不受溶剂影响,可在观察时选择适当的激发波长,在不同溶剂中,其发射光谱有所不同,可以根据实验需求选择合适的溶剂以获得最佳的荧光效果,在细胞染色实验中,观察到细胞中LDs的发射光谱约为500nm处,通过对比实验发现,相较于旧版LipiDye和传统LD染料,LipiDye II具有出色的光稳定性,即使在长时间的延时成像下,其荧光强度几乎没有任何变化,通过MTT法评估了不同浓度LipiDye II对细胞活力的影响,证明了其较低的细胞毒性。
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